背景介紹
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)是一種基于酶反應(yīng)檢測蛋白質(zhì)(如致病蛋白、抗原和抗體)的簡便方法。這種方法的潛在應(yīng)用取決于被評估的抗原-抗體反應(yīng)的特異性和強(qiáng)度。由于ELISA需要使用純化的抗原和功能特殊的抗體，因此研究人員強(qiáng)烈建議使用其他方法，如LC-MS（液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用）和各種芯片實(shí)驗(yàn)室方法。目前LC-MS診斷的發(fā)展趨勢是專注于藥物和生物標(biāo)志物(包括多肽和類固醇)的檢測，因?yàn)楹茈y制備針對這些小分子的合適抗體，基于芯片實(shí)驗(yàn)室的平臺被認(rèn)為提供了更容易的樣品制備、化學(xué)操作和反應(yīng)，并使用各種新的檢測技術(shù)。除了該限制外，ELISA法有許多優(yōu)點(diǎn)，包括簡單、實(shí)用(如果將其用作比色法，則不需要特殊和昂貴的儀器)、快速和合理的成本。傳統(tǒng)的ELISA法的挑戰(zhàn)是其檢測靈敏度。ELISA夾心法是將識別同一目的蛋白的兩個(gè)不同表位的抗體固定在固體表面并進(jìn)行特異性捕獲的方法，適用于定量檢測。許多研究報(bào)告經(jīng)過一些方法修改后的ELISA法具有很高的檢測靈敏度，從而提供了超靈敏的ELISA法。